HP21100 安捷倫液相色譜儀 , 包含HP1100 四元泵, 主動進樣器,VWD 檢測器和色譜任務站;UV 21800紫外可見分光光度計 ,U PW S2IV 2107 超純水器(qi) , 色譜純甲醇(chun)、超純水, 單(dan)寧酸(A. R. 份(fen)子(zi)式C76H52O46, 份(fen)子(zi)量1701. 25) 貴州遵義市第二(er)化工場, 余(yu)甘子(zi)(收(shou)羅于泉州惠安縣(xian))。
1. 2 色譜前提氣相氣相色譜柱為HypersilODS (4. 0×125mm , 5Lm) 氣相氣相色譜柱; VWD 檢查器調里檢查主波長為275nm; 移動相為甲醇和水(體型比80∶20) ; 水流量為0. 5mL ·m in- 1; 柱溫: 高溫; 進樣量2LL。1. 3 備樣代理購選創新的余甘子, 洗濯去核, 烤干, 稱取350. 0g 果肉于均勻攪拌器中擊碎。將擊碎的余甘子果肉拿水浸提,領取350. 0mL 提煉液。用0. 45Lm 濾膜吸附, 進樣2LL。1. 4 正確溶劑的制取于電子天平上(shang)稱取0. 0030g 單(dan)寧(ning)酸(suan)(A. R. ) , 用乙(yi)醇、水、丙酮(tong)體積(ji)比(bi)為69. 9%、29. 8%、0. 3% 的溶(rong)(rong)(rong)液(ye)作(zuo)溶(rong)(rong)(rong)劑消融并定容, 制備成濃(nong)度(du)為30. 00Lgöm L 的單(dan)寧(ning)酸(suan)規范溶(rong)(rong)(rong)液(ye)100mL。上(shang)述規范溶(rong)(rong)(rong)液(ye)用0. 45Lm 濾(lv)膜過濾(lv)備用。進(jin)樣2LL 闡發, 在該前提下, 標樣和(he)余(yu)甘子樣品色譜圖(tu)見圖(tu)1—2。
2 液相色譜儀HPLC測定余甘子中單(dan)寧酸(suan)含量(liang)的成(cheng)果與會商
2. 1 色譜實質購選用UV 21800 紫外可見分光光度計測(ce)得單(dan)寧酸在(zai)275nm 處有(you)強接(jie)收(shou), 固然(ran)丙(bing)酮(tong)在(zai)275nm 四周也有(you)較(jiao)大(da)接(jie)收(shou),但不影(ying)響單(dan)寧酸的闡發(fa)定量(liang), 故用(yong)(yong)VWD 檢測(ce)器調理檢測(ce)波長為(wei)275nm。嘗試(shi)用(yong)(yong)HypersilODS 色譜柱(zhu), 轉變(bian)活(huo)動相(甲醇(chun)和水(shui)) 配比(bi), 流速, 柱(zhu)溫(wen)(wen), 成果標明活(huo)動相為(wei)甲醇(chun)和水(shui)(體積比(bi)80∶20) ; 流速為(wei)0. 5mL ·m in- 1; 柱(zhu)溫(wen)(wen): 室溫(wen)(wen)時的出(chu)峰環境為(wei)*。
2. 2 單寧酸規范化水溶液溶液的選好水、酒精、異丙醇都行適用于單寧酸的去除, 為了讓使本方式的用大規模更廣, 分別試穿了以水、酒精、異丙醇差異比例的混和硫酸銅液體作標液的高沸點高沸點溶劑, 試穿研究成果注明用酒精、水、異丙醇質量分數之比69. 9%、29. 8%、0. 3% 的硫酸銅液體作高沸點高沸點溶劑時出峰條件為*。2. 3 波形重歸式子、相干公式別離配制單寧酸規范溶液120、150、180、210、240ng/m L 用0. 45Lm濾膜過濾, 進樣后獲得兩種單寧酸的回歸方程, 單寧酸1: y = m 1x + b1,m 1= 3. 61220×10- 1, b1= - 12. 62814, r= 0. 99996; 單寧酸2: y =m 2x + b2, m 2 = 3. 30394×10- 1, b2 = - 4. 24693, r= 0. 99998。線(xian)性規(gui)模為(wei)120—240ng/mL。
2. 4 緊黏度去嘗試用120ngmL 單寧酸技術規范懸濁液, 不斷進樣4 次, 測試研究成果見表1。
取已知(zhi)單(dan)寧酸含量的余甘子(zi)水提(ti)液(ye)濃縮液(ye)5mL , 插手240ngm L 的單(dan)寧酸規范(fan)溶(rong)液(ye)5mL , 再(zai)用(yong)70% 乙醇濃縮, 定容至25mL。將以上溶(rong)液(ye)用(yong)0. 45Lm 濾(lv)膜過濾(lv), 按(an)2. 2 項色(se)譜前(qian)提(ti)停(ting)止HPLC闡(chan)發(fa), 測定單(dan)寧酸的收受接(jie)管率, 成果見(jian)表2。
3液相色譜儀HPLC測定(ding)余甘子中單寧酸含量的論斷
利用液相色譜法測定余甘(gan)子中單(dan)(dan)寧(ning)酸的(de)含量(liang)操縱簡潔, 3m in 可實現單(dan)(dan)次檢測, 在120—240ng/mL 的(de)規模(mo)內(nei)有杰出的(de)線性干系(xi), 相干系(xi)數達99. 996% 以(yi)上(shang), 加標收(shou)受接管率(lv)在99. 7% —107. 5% 之間。本方式疾速(su), 便利(li), 靠得(de)住, 可用于多(duo)種物資中單(dan)(dan)寧(ning)酸含量(liang)的(de)測定。
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