
本文拔取我國住民平常食用的首要豆成品,對此中雌激素樣活性較強的染料木素和大豆苷元以 及它們對應的糖苷停止定量檢測,從大豆異黃酮的構成和含量兩方面停止闡發評價,進而領會我國豆成品中大豆異黃酮含量的根基環境,為今后周全深切的研討奠基 根本。因為食物中大豆異黃酮的檢測還沒有國度規范,是以選用較通用的液相色譜法為本研討的檢測方式。
1 資料與方式
1.1 資料與試劑
規范品;大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素;正己烷、甲醇(闡發純);甲醇(色譜純)。
1.2 儀器與裝備
Waters 1525液相色譜儀,體系包含515HPLC雙泵、Waters 2996光電二級管列檢測器;DZG-6050真空枯燥箱;KQ-2200超聲波洗濯器。
1.3 方式
1.3.1樣品制備
固體樣品10~45 g,破壞,55℃真空枯燥24h,進一步破壞,每份稱取0.2 g;加5mL正己烷,超聲脫脂10 min,離心(3 000 r/min,3 min)。棄去正己烷;加10mL 80%甲醇,超聲萃取10min,離心(3 000 r/min,3 min),轉移上清液,透風櫥中70℃水浴揮發至干,80%甲醇復溶至0.4mL,過膜,待測。
液體樣品10 mL;加2.5 mL正己烷,超聲萃取10 min,靜置,棄去下層脂肪層。取2 mL溶液。加8 mL甲醇,超聲萃取10 min,離心(3 000 r/rain,3 min),轉移上清液,透風櫥中70℃水浴揮發至干,80%甲醇復溶至0.4 mL,過膜,待測。
1.3.2 HPLC前提
色譜柱為kromasil C18柱(4.6minx250mm,5um);活動相為甲醇(A)/水(B),梯度洗脫前提:0-15 min,30%~70%B,15~30 min。70%-30%B;流速0.6 mL/min;柱溫25℃;進樣量20uL;檢測波長254 nm。
1.3.3規范曲線的繪制
稱取4種對比品各5 mg擺布,而后別離置于10 mL容量瓶中,80%甲醇消融,定容、搖勻,配成約0.5 mg/mL儲備液。再由儲備液別離配成約2、4、8、16、32、64、128 mg/L的7個濃度梯度任務液,HPLC檢測。
2 成果與闡發
2.1 方式學考查
由分手成果圖1可看出,在此色譜前提下4種化合物分手杰出,保留時候適合。
2.1.1線(xian)性干系及檢出限

2.1.2重現性
每類樣品選1個樣,每一個樣稱取劃一品質5份。按上述方式制備后對每份樣做含量檢測,檢測成果發明每類樣品中。4種化合物含量的RSD值均≤2.58%,申明此方式重現性好,精確度高。
2.1.3緊密度
每類樣品選1個樣,持續進樣6次,檢測成果發明每類樣品中,4種化合物含量的RSD值均≤2.78%,申明此方式重現性好,緊密度高。
2.1.4收受接管率
每(mei)(mei)類樣(yang)品選(xuan)1個(ge)(ge)樣(yang),在(zai)測得已知(zhi)含量(liang)的樣(yang)品溶液中,按方(fang)式(shi)學準繩,在(zai)0.5~2倍(bei)之(zhi)間取3個(ge)(ge)濃度(du)0.5、l、2,加標,測3次,計較收受(shou)接(jie)管(guan)(guan)率(lv)。每(mei)(mei)類樣(yang)品在(zai)差別 加標倍(bei)數下(xia),4種(zhong)化(hua)合(he)物(wu)的收受(shou)接(jie)管(guan)(guan)率(lv)規模別離為D:88.30%-105.53%。G:84.92%-l 13.7%,Da:93.07%-115.76%,Ge:91.18%-107.92%。RSD規模:1.22%-3.56%。申明此(ci)方(fang)式(shi)加標收受(shou)接(jie)管(guan)(guan)率(lv)較 好,精確度(du)較高。